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小鼠破骨细胞的使用方法和注意事项

发布时间:2021-08-25 点击量:46
  小鼠破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处,破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。
       破骨细胞的主要功能是维持骨吸取和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化,是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
  小鼠破骨细胞分离自骨组织和骨髓;破骨细胞是骨组织中的多核巨细胞,位于骨组织表面的浅凹处。目前一般认为破骨细胞是分离自骨骼外的造血系统,其前体可能属于造血干细胞的前单核细胞。破骨细胞的主要功能是维持骨吸取和骨形成的相对平衡,若失去这种平衡则发生病理性变化,因此多数学者从破骨细胞着手研究破骨细胞的结构、功能探讨骨吸取,形成相互平衡的机制。但破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短。
  一、使用方法:
  1、小鼠破骨细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短;建议您收到细胞后尽快进行相关实验,此细胞不建议传代。取出细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
  2、细胞消化
  1) 吸出细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
  2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
  3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
  4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
  二、注意事项:
  1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
  2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
  3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

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